产品介绍：
慢病毒载体（Lentiviral vectors，LV）是在人免疫缺陷病毒（HIV-1）基础上 改造而成的病毒载体系统，能非常高效地将外源基因稳定整合进入哺乳 动物细胞中，对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力。因其广泛的靶 向性和对目的基因的灵活选择性，现广泛应用于稳定转基因过表达、持续基因沉默、基因编辑、动物免疫、成像示踪、诱导多功能干细胞修饰等研究领域。
复百澳生物可提供丰富的慢病毒产品，20000+现货产品库可供选择；涵盖慢病毒过表达、干扰、敲除等不同使用场景；支持产品定制，全面满足客户需求。
产品优势：
支原体： 支原体检测阴性
载体容量大：可插入外源基因3-4kb
滴度高：产品滴度可达1E+9TU/ml
实验周期快：定制产品周期10个工作日起
严格质控：10项流程质控、6项质量检测
特异靶向：多种类型病毒外壳可供选择
包装系统：
注意：第三代包装体系专一性较强，仅适配第三代转移载体；而第二代体系具备更广泛的兼容性，可同时支持第二代和第三代转移载体。第三代转移载体在5'LTR区域进行了关键性改造，其U3元件被替换为CMV或RSV等外源强启动子。这种结构优化使得病毒基因组的转录过程摆脱了对Tat蛋白的依赖性，因此第三代包装系统的核心质粒组件中不再包含Tat蛋白编码序列。相比之下，第二代转移载体保留了完整的野生型LTR结构（包含U3-R-U5元件），其转录激活必须依赖Tat蛋白的反式调控作用。
服务内容：
产品类型 | 服务类型 | 交付标准 | 产品滴度 | 周期 | 产品应用 |
慢病毒（LV） | 现货 | 1×10^8 TU | ≥1×10^8 TU/ml | 2周起 | 细胞转导 |
定制服务 | 1×10^9 TU | ≥1×10^9 TU/ml | 2周起 | 体内注射 |
流式分析：
应用案例：
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- FLV117
- LV-Luc2-Puromyucin
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- LUC示踪慢病毒
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- FLV026
- LV-Puromycin
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- 对照慢病毒
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- LV-Hygromycin
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- FLV141
- LV-NeoR-OE
- 200μL/支
- 对照慢病毒
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- FLV024
- LV-EGFP
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- 对照慢病毒
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- FLV109
- LV-EGFP-Puromycin
- 200μL/支
- 对照慢病毒
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- FLV050
- LV-mCherry-Puromycin
- 200μL/支
- 对照慢病毒
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- FLC352
- LV-mCherry-TUBG1-Puromycin
- 200μL/支
- 微管定位慢病毒
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- FLC353
- LV-EGFP-TUBA1B-Puromycin
- 200μL/支
- 微管定位慢病毒
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- FLC2133
- LV-stubRFP-sensGFP-hLC3B
- 200μL/支
- 自噬慢病毒
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- FLC2563
- LV-SARS-COV-2-E-OE
- 200μL/支
- 过表达慢病毒
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- FLC2591
- LV-ACE2-3FLAG-OE
- 200μL/支
- 过表达慢病毒
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- FLC2629
- LV-SARS-COV-2-N-OE
- 200μL/支
- 过表达慢病毒
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- FLC2630
- LV-SARS-COV-2-M-OE
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- 过表达慢病毒
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- FLC5871
- LV-SV40LT-Hygro-OE
- 200μL/支
- 过表达慢病毒
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慢病毒感染细胞实验流程
一、细胞接种
细胞状态良好,接种至培养器皿,保证24h后细胞汇合度达到50%-60%。
二、细胞感染
1.感染液配置病毒感染液=病毒原液+稀释液(培养基)
2.计算病毒用量病毒用量=(细胞数量*MOI值)/病毒滴度
3.加入感染体系去除细胞原培养基,加入病毒感染液
三、继续培养
8-12h后更换新鲜培养基继续培养
四、确认表达效果
感染72h后进行基因表达检测或功能性实验
特殊细胞注意事项
一、悬浮细胞
感染悬浮或半悬浮细胞,建议通过平角离心转染法,先重悬细胞,然后将适量的病毒液加入细胞培养皿后，封好口,放入平角离心机,低速(1200g)离心1h,然后放入培养箱中正常培养即可。若由于实验条件有限,没有平角离心机,可用离心管代替,将细胞吹打吸入离心管中,进行低速离心,去掉大部分上清,然后加入适量的病毒液,室温放置15 min(尽量不要超过30 min),然后将细胞和病毒液同时吸出转入培养皿中继续病毒感染过夜即可。
二、极难感染的细胞
对于极难感染的细胞,可采用多次感染的方法,即感染一次后,重新加入新鲜病毒再次感染,可显著提升感染效率。
注:多次感染的时间间隔需要根据细胞状态来调整,要保证每次感染前细胞处于较良好状态。
三、传代能力较差的原代细胞、非分裂细胞
原代细胞:由于细胞增长缓慢,可以在接种时提高汇合度到50%~60%,确保在感染后4天时细胞汇合度达到90%~100%;非分裂细胞:如神经元细胞,接种后不再增殖,需要按照100%的汇合度进行接种。
常见的细胞感染MOI
细胞名称 | 种属 | 细胞中文名 | MOI值 |
5637 | 人源 | 人膀胱癌细胞株 | 10 |
7402 | 人源 | 人肝癌细胞 | 10 |
293T | 人源 | 人胚肾上皮细胞 | 1 |
5-8F | 人源 | 人鼻咽癌细胞株 | 100 |
95D | 人源 | 人肺巨细胞癌 | 2 |
A375 | 人源 | 人黑色素瘤 | 10 |
A498 | 人源 | 人肾癌细胞 | 100 |
A549 | 人源 | 人肺腺癌 | 20 |
A673 | 人源 | 人横纹肌瘤细胞 | 10 |
AGS | 人源 | 人胃癌细胞 | 100 |
COC1 | 人源 | 人卵巢癌 | >100 |
EC9706 | 人源 | 人食管癌细胞 | 10 |
H-125 | 人源 | 人肺癌细胞 | >100 |
HepG2 | 人源 | 人肝癌细胞 | 10 |
U251 | 人源 | 人脑胶质母细胞瘤 | 1 |
B16 | 鼠源 | 小鼠黑色素瘤细胞 | >100 |
4T1 | 鼠源 | 小鼠乳腺癌细胞 | >100 |
NIH-3T3 | 鼠源 | 小鼠成纤维细胞系 | 20 |
BRL | 鼠源 | 大鼠肝细胞 | 20 |
GH3 | 鼠源 | 垂体腺瘤细胞 | 100 |
NR8383 | 鼠源 | 大鼠肺泡巨噬细胞 | 1 |
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