(adeno-associated virus.AAV)载体因其高效转导率、持久的表达能力和良好的安全性等特点,在遗传病的体内基因治疗领域得到广泛应用。目前，全球已上市的AAV基因疗法有7款。截至2024年2月8日已经有37款AAV基因治疗药物IND申报（受理/批准），其中3款进入III期临床（纽福斯的NR082、信致医药的BBM-H901、诺华的OAV101）。这也意味着中国的AAV基因疗法即将迈入下一阶段——商业化。
预存免疫对基因疗法的阻碍
AAV载体基因治疗产品在体内有效发挥治疗作用的前提是突破机体对于病毒的免疫屏障,包括针对AAV载体药物成分(蛋白和核酸)的免疫应答,将治疗基因递送至靶组织。AAV载体在自然界广泛存在,有研究报道,预存AAV抗体的存在,其阳性率与许多因素有关,包括AAV血清型,地理区域和受试者的年龄等,针对部分血清型的抗体阳性率高达50% ~90%。因此,针对AAV载体的预存免疫是给药前的关注重点。
对大量临床前和临床试验数据的分析表明,在AAV载体基因治疗领域最大的影响来自于中和抗体(neutralizing antibody,NAb)对药物的中和作用,从而导致疗效的显著降低,并且还可能由于形成大量免疫复合物而导致不良事件的发生。因此,在各国的相关指南中均要求对预存抗体情况进行检测，在临床实践中大多采用NAb作为受试者的排除标准,但在具体排除标准的设置方面仍面临着挑战。
AAV中和抗体检测原理
AAV病毒含有病毒的中和抗原，且具有感染细胞活力；中和抗体可以识别AAV病毒，并发生中和反应，降低AAV病毒感染能力，导致携带的报告基因（如绿色荧光蛋白EGFP、荧光素酶Luciferase等）表达量减弱。通过Elispot读数仪扫描计数每孔的荧光斑点数，或多功能酶标仪读取每孔的荧光素酶表达量，将待测样品孔的数值与病毒对照组的数值进行比较，可计算待测样品的抑制百分比。计算当50%病毒被抑制时抗体的稀释倍数的倒数即中和抗体滴度。
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