嵌合抗原受体T细胞（CAR-T）疗法已成为癌症治疗领域中一种突破性的免疫疗法，这种突破性的免疫疗法通过在体外对患者T细胞进行编辑使其表达CAR，让它们能够准确识别并消灭癌细胞。尽管体外T细胞疗法在治疗各类血液癌症方面已取得显著成效，也有多款产品获批，但其在生产流程和成本方面仍面临诸多挑战，这限制了其面向广大人群的普及程度。

 为了克服当前体外CAR-T细胞治疗产品制备过程中存在的复杂性和高昂的制造成本，近年来在体内直接生成CAR-T细胞的策略也在被尝试，在2025年随着阿斯利康收购EsoBiotec彻底掀起in vivo CAR-T的热潮。

与传统CAR-T相比，in vivo CAR-T利用T细胞趋向性慢病毒、T细胞靶向LNP等递送系统，将CAR编码元件（DNA/mRNA）精准递送至内源性T细胞，通过载体介导的基因转导或胞内释放，完成CAR的转录、翻译与膜表面表达，从而实现对 T 细胞的功能改造。改造后的CAR-T细胞可特异性识别肿瘤或病变细胞抗原，激活杀伤功能，实现靶向清除。该技术省去了“体外采集-基因改造-扩增-回输”的复杂步骤，单次注射即可启动治疗，大幅缩短疗程，降低了对自体 T 细胞质量的依赖，拓宽了适用人群，同时也避免了传统疗法中清淋预处理可能引发的感染等风险。

体内CAR的递送需要满足一些特定条件，包括精确的T细胞靶向、高效的基因转导效率且较低的毒性。目前，病毒载体和非病毒载体已被广泛研究并应用于CAR构建体的体内递送。

病毒载体：以慢病毒载体为基础，结合水泡口炎病毒糖蛋白、尼帕病毒和麻疹病毒等病毒源的糖蛋白进行伪装，并与针对T细胞的分子（如针对CD3、CD4、CD8或CD8的单链可变片段（scFv））结合。它们与T细胞结合后，慢病毒颗粒通过膜融合或内吞作用被内化进而完成CAR-T细胞制备

LNP：通过将CD3、CD4、CD5、CD7和CD8的抗体或单链可变片段（scFv）整合到LNPs中。其机制为利用编码CAR的mRNA封装在LNP中进行体内CAR-T细胞生成，LNP通过与T细胞抗原（如CD3、CD4、CD5和CD8）的相互作用进行功能化，以选择性地与T细胞结合。