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腺病毒(Adenovirus)

腺病毒(adenovirus)载体,是以腺病毒为原型进行基因功能改造而成的,无外壳的双链DNA病毒,病毒载体转基因效率高,体外实验通常接近100%的转导效率;可转导不同类型的人组织细胞,不受靶细胞是否为分裂细胞所限;容易制得高滴度病毒载体,在细胞培养物中重组病毒滴度可达1.0E+11PFU/ml;进入细胞内并不整合到宿主细胞基因组,仅瞬间表达,安全性高。

复百澳公司Admax腺病毒包装系统(E1E3双缺失),该系统是将辅助质粒和穿梭质粒共转HEK293细胞,在细胞内过Cre/loxP重组酶系统发生 重组从而获得目的腺病毒毒。该系统操作简便、重组效率高、获得的病毒产率高(一般大于104vp/cell)、目的基因的表达水平高(因为mCMV启动子比hCMV启动子强若干倍)等优点。


腺病毒包装及感染示意图:



腺病毒感染细胞图片:


 

用途

元件顺序

筛选标签

干扰腺病毒载体

hU6-MCS-CMV-Puromycin

Puromycin

干扰腺病毒载体

hU6-MCS-CMV-RFP

RFP

干扰腺病毒载体

hU6-MCS-CMV-EGFP

EGFP

过表达腺病毒载体

CMV-MCS

N/A

过表达腺病毒载体

CMV-MCS-3FLAG-SV40-EGFP

EGFP

过表达腺病毒载体

CMV-MCS-3FLAG-SV40-RFP

RFP

过表达腺病毒载体

CMV-MCS-3FLAG-SV40-EGFP-IRES-puromycin

EGFP、Puromycin

以上仅列举部分载体信息,此外有多种启动子(如:Ubi、EF1a)和筛选标记(如:cherry、copGFP)可供选择。

 

腺病毒产品服务流程:

 

 

相关服务信息:

1. 腺病毒介导基因表达

2. 腺病毒介导RNA干扰

3. 腺病毒介导microRNA表达与抑制

4. 腺病毒介导基因组编辑


病毒载体选择:

 

慢病毒载体

腺病毒载体

腺相关病毒载体

感染性

分裂期/不分裂期

分裂期/不分裂期

分裂期/不分裂期

整合性

随机整合

不整合

不整合或安全整合

基因过表达

YES

YES

YES

基因干扰

YES

YES

YES

稳定细胞株

Yes

NO

NO

载体容量

≤5K

≤8K

≤5K

表达时间

2~4天

1~2天

1~2

免疫原性

组织靶向性

NO

NO

YES

病毒滴度

1E+8~1E+9 TU/mL

1E+11~1E+12 PFU/mL

1E+11~1E+13 vg/mL


腺病毒操作常见:技术支持栏

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